このキットは、二重抗体サンドイッチ技術を利用して、CHO-K1細胞株に由来する残留宿主細胞タンパク質 (HCP) を定量化する固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) を採用しています。
CHO-K1のHCPに特異的なヒツジのポリクローナル抗体をアッセイに用いて、サンプル中に残っている全てのHCPを捕捉した。 キャリブレーション標準またはテストサンプルは、HRPで標識されたanti-CHO-K1 HCP抗体とともに、アフィニティ精製捕捉抗体で事前コーティングされたマイクロタイタープレートに同時に追加され、続いてインキュベーションおよび洗浄が行われました。 TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を反応に加え、HRP酸化によって触媒されて青色生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成した。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450 nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、校正標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のHCPの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| Anti-CHO-K1 HCP Microtiterストリップ | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| CHO-K1 HCPキャリブレーション標準 | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-CHO-K1 HCP:HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 3-300 ng/mL、R2> 0.990 | ||
| 精度 | 回収率 = 94.2%-122.6% | ||
| LLOQ | 3 ng/mL | ||
| ULOQ | 300 ng/mL | ||
| 精度 | 2.6%-6.1% (CV≤ 20%) | ||
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC-MS) | 94.6% | ||
| 特異性 | Sf9、HEK293T、E。coli BL21、P。pastoris HCPとの交差反応性はありません。 | ||
| 丈夫さ | 25 ± 5 ℃ 、CV≤ 20% でインキュベーション | ||
| MD Spectra Max ABSおよびThermo Multiskan FCに限定されない楽器の適合性 | |||
深セン®CHO HCP ELISAキット (ワンステップELISA)
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