このキットは、残留Eを検出するための二重抗体サンドイッチ技術を備えた固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) を採用しています。サンプル中の大腸菌 (タンパク質発現株) 宿主細胞タンパク質 (HCP)。 E.coli (タンパク質発現株) に特異的なポリクローナル抗体HCPをアッセイに使用して、サンプル中に残っているすべてのHCPを捕捉した。 キャリブレーション標準 (またはテストサンプル) とanti-E.coli (タンパク質発現株) HCP抗体で標識されたHRP (西洋ワサビペルオキシダーゼ) の両方が、事前にコーティングされたマイクロタイタープレートに同時に追加されました。インキュベーションと洗浄のステップが続きます。 次に、反応のためにTMB (3,3 '、5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を追加し、HRPはHによるTMBの酸化を触媒しました2O2青色の生成物 (655nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 その後、停止溶液を添加して酵素反応を終了させ、黄色の生成物 (450nmでの最大吸収ピーク) を生じる。 450nm波長での吸光度値は、キャリブレーション標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中の大腸菌 (タンパク質発現株) の濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| E.coli HCP-E校正スタンダード | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| Anti-E.coli HCP-E Microtiterストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-E.coli HCP-E:HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 1.5-243 ng/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回収率 = 83.8%-110.2% |
| LLOQ | 1.5 ng/mL |
| ULOQ | 243 ng/mL |
| LOD | 1.19ng/mL |
| 精度 | 4.5%-8.6% (CV≤ 15%) |
| 抗体カバレッジ (IMBS-2D) | 70.6%-100% |
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC/MS) | 88.8% |
| 特異性 | CHO、Vero、HEK293T、Hansenula polymorpha HCPとの交差反応性はありません |
| 丈夫さ | 25 ± 5 ℃ 、CV≤ 15% でインキュベーション Thermo Multiskan FC、Bio-Tek Synergy2に限定されない楽器の適合性 |
深セン®E.coli (K-12 & アルカリ溶解) HCP ELISAキット
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