深セン®ヒトIFN-γ ELISAキットは、CAR-T細胞の効力アッセイなど、ヒトインターフェロンガンマ (IFN-γ) の定量に適しています。
このキットは、ヒトIFN-γ を検出するための二重抗体サンドイッチ技術を使用した固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) に基づいています。 ヒトIFN-γ に特異的な抗体をアッセイに用いて、サンプル中の任意のヒトIFN-γ を捕捉した。 キャリブレーション標準とテストサンプルの両方を、アフィニティ精製捕捉抗体でコーティングされたマイクロタイタープレートに同時に追加し、続いてインキュベーションと洗浄を行いました。 ビオチン化抗体をマイクロタイタープレートに添加してヒトIFN-γ に結合し、ストレプトアビジン標識HRP (西洋わさびペルオキシダーゼ) と反応させました。 TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質が反応に添加され、HRPはHによるTMBの酸化を触媒しました2O2青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450 nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、校正標準およびサンプルのヒトIFN-γ 濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のヒトIFN-γ の濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| ヒトIFN-γ 校正基準 | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| 抗ヒトIFN-γ マイクロタイターストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-hIL-6: ビオチン化共役 (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 5-400 pg/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回収率 = 88.6%-107.9% |
| LLOQ | 5 pg/mL |
| ULOD | 400 pg/mL |
| 検出制限 | 1 pg/mL |
| 特異性 | ヒトIL-2、ヒトIL-6、ヒトIL-7、ヒトIL-10、ヒトIL-12、ヒトIFNGR1、ヒトIFNGR2、ヒトIFN-α2b、ヒトIFN β 、ラットIFN γ 、マウスIFN γ との交差反応はありません。 |
| 精度 | 3.9%-9.0% (CV≤ 20%) |
| 丈夫さ | 25 ± 3 ℃ 、CV≤ 20% でインキュベーション |
| MD Spectra Max ABSおよびThermo Multiskan FCに限定されない楽器の適合性 |
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