このキットは、残留Eを検出するための二重抗体サンドイッチ技術を備えた固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) を利用します。サンプル中の大腸菌 (タンパク質発現株) 宿主細胞タンパク質 (HKP)。 E.coli (タンパク質発現株) に特異的なポリクローナル抗体HCPをアッセイに使用して、サンプル中に残っている任意のHCPを捕捉した。 キャリブレーション標準サンプルとテストサンプルの両方を、アフィニティ精製捕捉抗体でコーティングされたマイクロタイタープレートに同時に追加し、続いてインキュベーションと洗浄を行いました。 ビオチン化抗体をマイクロタイタープレートに添加してHCPに結合し、次にHRP (西洋ワディッシュペルオキシダーゼ) で標識されたストレプトアビジンと反応させた。 TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質が反応に添加され、HRPはHによるTMBの酸化を触媒しました2O2青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450 nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、校正標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のHCPの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| E.coli HCP-E校正スタンダード | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| Anti-E.coli HCP-E Microtiterストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-E.coli HCP-E: ビオチン化共役 (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 1-243 ng/mL、R ²>0.990 |
| 精度 | 回収率 = 87.1%-108.3% |
| LLOQ | 1.5 ng/mL |
| LOD | 0.0113 ng/mL |
| 繰り返し可能性 | 3.5%-4.9% (CV≤ 20%) |
| 抗体カバレッジ (IMBS-2D) | 70.6%-100% |
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC/MS) | 88.8% |
| 特異性 | CHO、Vero、HEK293T、Hansenula polymorpha HCPとの交差反応性はありません |
| 丈夫さ | 25 ± 3 ℃ 、CV≤ 20% でインキュベーション |
| Thermo Multiskan FC、Bio-Tek Synergy2に限定されない楽器の適合性 |
深セン®E.coli (K-12 & アルカリ溶解) HCP ELISAキット
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