このキットは、二重抗体サンドイッチ技術を備えた固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) を利用して、サンプル中のHEK293細胞からの残留宿主細胞タンパク質 (HCP) を検出します。 HEK293 HCPに特異的なポリクローナル抗体をアッセイに使用して、サンプル中に残っている任意のHCPを捕捉した。 HCP抗体anti-HEK293標識されたキャリブレーション標準 (またはテストサンプル) とHRP (西洋ワサビペルオキシダーゼ) の両方が同時にマイクロタイタープレートに追加されました。アフィニティ精製キャプチャ抗体でコーティングされ、続いてインキュベーションと洗浄が行われました。 次に、TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を反応に添加し、HRPはTMBの酸化を触媒しました。H2O2青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長の吸光度値は、キャリブレーション標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のHCPの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| HEK293 HCPキャリブレーション標準 | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| Anti-HEK293 HCP Microtiterストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-HEK293:HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 6-540 ng/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回復率 = 96.7%-102.9% |
| LLOQ | 6 ng/mL |
| LOD | 1 ng/mL |
| 精度 | 2.4%-3.7% (CV≤ 20%) |
| 抗体カバレッジ (IMBS-2D) | 67.1%-82.8% |
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC/MS) | 79.7% |
| 特異性 | P.pastorisおよびSf9細胞との交差反応性はありません。 |
| 丈夫さ | 25 ± 3 ℃ 、CV≤ 20% でインキュベーション |
| インキュベーション速度: 500-600 rpm | |
| サーモマルチスカンFC、MDスペクトルマックスABSマイクロプレートリーダーに限定されない機器適合性 |
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