このキットは、P。pastoris細胞からの残留宿主細胞タンパク質 (HDP) を検出するための二重抗体サンドイッチ技術を使用した固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) に基づいています。 P.pastoris HCPsに特異的なヒツジのポリクローナル抗体をアッセイに用いて、サンプル中に残っている全てのHCPを捕捉した。 抗体被覆率は、現在の主流の方法によって評価される。 Anti-P.pastoris HCP抗体で標識されたキャリブレーション標準 (またはテストサンプル) とHRP (西洋ワサビペルオキシダーゼ) の両方が、アフィニティ精製捕捉抗体でコーティングされたマイクロタイタープレートに同時に追加されました。インキュベーションと洗浄が続きます。 次に、TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を反応に添加し、HRPはH2O2によるTMBの酸化を触媒して、青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成しました。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450 nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、キャリブレーション標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のHCPの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| P.pastoris校正標準 | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| 反P.pastorisHCP Microtiterストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| Anti-P.pastoris:HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 2-200 ng/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回収率 = 97.7%-110.2% |
| LLOQ | 2 ng/mL |
| LOD | 0.5 ng/mL |
| 繰り返し可能性 | 6.6%-8.0% (CV≤ 20%) |
| 抗体カバレッジ (IMBS-2D) | 72.1%-96.0% |
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC/MS) | 99.2% |
| 丈夫さ | Thermo Multiskan FCおよびMD Spectra Max ABSの機器適合性に制限はありません |
深セン®残留Pichia pastoris DNA定量化キット
メール:Info@shentekbio.com
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