このキットは、生物学的製品の製造プロセスにおけるトリプシン-アナログの存在を判断するためのものであり、TrypLEなどの残留酵素を特定することができます。™Thermo Fisher Scientific、Sartoriusの組換えトリプシン、HyrTrypから™Cytivaから。
トリプシン類似体は、Fusarium oxysporum DSM2672の発酵生産から得られる非動物由来の高純度組換え真菌酵素です。 トリプシン-アナログは、標準的なトリプシン溶液と同様に、リジンおよびアルギニン残基のC末端側のペプチドを切断します。これは、さまざまな付着細胞を解離させるために使用できます。HEK293、A549、正常ヒト表皮ケラチノサイト (NHEK) 、および胚性幹細胞 (ESC) が含まれますが、これらに限定されません。
このキットは、サンプル中の残留トリプシン類似体を検出するための二重抗体サンドイッチ技術を備えた固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) に基づいています。 トリプシン-アナログに特異的なヒツジのポリクローナル抗体をアッセイに用いて、サンプル中の残りのトリプシン-アナログを捕捉した。 キャリブレーション標準 (またはテストサンプル) とHRP (西洋ワサビペルオキシダーゼ) でラベル付けされた抗トリプシン-アナログ抗体の両方が同時にマイクロタイタープレートに追加されました。アフィニティ精製キャプチャ抗体でコーティングされ、続いてインキュベーションと洗浄が行われました。 次に、TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を反応に添加し、HRPはHによるTMBの酸化を触媒しました2O2青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450 nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、キャリブレーション標準およびサンプルのトリプシン-アナログ濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のトリプシン-アナログの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| トリプシン-アナログ校正標準 | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| アンチトリプシン-アナログMicrotiterストリップ | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| アンチトリプシン-アナログ: HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 0.16-10.24 ng/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回収率 = 94.0%-99.1% |
| LLOQ | 0.16 ng/mL |
| ULOQ | 10.24 ng/mL |
| 検出制限 | 0.0319 ng/mL |
| 繰り返し可能性 | 3.6%-4.4% (CV≤ 20%) |
| 特異性 | 一般的なタンパク質類似体との交差反応性はありません (e。g。組換えヒトトリプシン、組換えウシトリプシンおよび組換えブタトリプシン) および一般的な工学細胞株 (e。g。MDCK、CHO、Vero、HEK293、E。coli、P。pastorisおよびSf9細胞) |
| 丈夫さ | 25 ℃ ± 5 ℃ 、CV≤ 20% でインキュベーション |
| Thermo Multiskan FC、Bio-Tek Synergy2に限定されない楽器の適合性 |
メール:Info@shentekbio.com
電話:
USモバイル: 1-908-822-3199
米国オフィス: 1-800-960-3004内線720
中国オフィス: 86-400-878-2189
アドレス:
USAサイト: 3350 Scott Blvd Bldg 6、サンタクララ、CA 95054
中国サイト: No.1366 Hongfeng Road,湖州,浙江,中国,313000