このベロエリサキットは、ベロ細胞から残留宿主細胞タンパク質 (HCP) を検出するための二重抗体サンドイッチ技術を使用した固相酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) に基づいています。 ベロHCPに特異的なヒツジのポリクローナル抗体をアッセイに用いて、サンプル中に残っている全てのHCPを捕捉した。 抗体被覆率は、現在の主流の方法によって評価される。 キャリブレーション標準 (またはテストサンプル) とHRP (西洋ワサビペルオキシダーゼ) でラベル付けされた抗Vero HCP抗体の両方が同時にマイクロタイタープレートに追加されました。アフィニティ精製キャプチャ抗体でコーティングされ、続いてインキュベーションと洗浄が行われました。 次に、TMB (3,3 ',5,5'-テトラメチルベンジジン) 基質を反応に添加し、HRPはTMBの酸化を触媒しました。H2O2青色の生成物 (655 nmでの最大吸収ピーク) を生成する。 次いで、停止溶液を添加して酵素反応を停止させ、黄色の生成物 (450nmでの最大吸収ピーク) を得た。 450 nm波長での吸光度値は、キャリブレーション標準およびサンプルのHCP濃度と正の相関関係がありました。 サンプル中のHCPの濃度は、用量反応曲線を使用して計算できます。
| コンポーネント | 配送条件 | 単位サイズ | 検出方法 |
| Vero HCPキャリブレーション標準 | 2-8 ℃ | 96テスト | サンドイッチELISA |
| Anti-Vero HCPマイクロタイターストリップ | |||
| 再構成ソリューション | |||
| 希釈 | |||
| 洗浄バッファー濃縮物 (10 ×) | |||
| アンチベロ: HRP (100 ×) | |||
| TMB基板 | |||
| ソリューションの停止 | |||
| シーリングフィルム |
| 直線性 & 範囲 | 3-243 ng/mL、R2> 0.990 |
| 精度 | 回収率 = 93.4%-108.1% |
| LLOQ | 3 ng/mL |
| LOD | 1 ng/mL |
| 精度 | 2.8%-5.0% (CV≤ 20%) |
| 抗体カバレッジ (IMBS-2D) | 65.1%-85.1% |
| 抗体カバレッジ (IMBS-LC/MS) | 76.9% |
| 特異性 | との交差反応性はありません大腸菌、P。パストリスとSf9セル。 |
| 丈夫さ | インキュベーション速度: 500 rpm - 600 rpm |
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