残留宿主細胞タンパク質の同定と定量

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組換えタンパク質は、主に細菌、酵母、哺乳類、昆虫、植物細胞株などの宿主細胞で発現します。生物生成プロセス中に、これらの宿主細胞は、正常な細胞機能に必要な副産物タンパク質も生成します。細胞がアポトーシス、死、および溶解を受けると、これらの副産物タンパク質は細胞培養培地に放出されます。その結果、残留宿主細胞タンパク質臨床の安全性と有効性に影響を与える可能性のある重要なプロセス関連の不純物になります。米国薬局方は、HCP残基レベルは1〜100 ng/mgの範囲であると規定しています。

ELISAアッセイは、いくつかの制限にもかかわらず、HCP定量化のための薬物使用法である。例えば、ELISAキットにおける抗体被覆率は、約50% 〜80% のみであり、これは、全てのHCPタイプをカバーすることができないことを意味する。さらに、ELISAはHCPの総量のみを測定でき、個々のHCPの種類と量に関する情報を提供することはできません。したがって、業界の専門家は、直交法としてHCPの正確な識別と定量分析に質量分析を使用することを推奨しています。

残留宿主細胞タンパク質分析における質量分析の応用

1.バイオプロセス最適化

さまざまなルートからの処理中のサンプルの比較研究を実施して、HCP除去の段階的な効率を分析し、それによって最適なルートを特定します。 ELISAは総HCP含有量しか検出できないため、含有量が高いが免疫原性が低い (抗体によって認識されない) 一部のHCPは効果的にモニターできません。したがって、より正確な監視のために、プロセス開発中に質量分析データを使用することをお勧めします。

2.最終製品のHCP分析

バイオプロセシングの安定性を評価するために、異なるバッチからの薬物物質の比較分析が行われる。この分析は、ELISAデータと組み合わせて、残留HCP不純物をさらに評価し、臨床リスクを軽減します。

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